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            裸鼠成瘤模型

             

            裸鼠腫瘤模型是比較常見和常用的一種腫瘤動物模型,它在皮下移植瘤腫瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠腫瘤模型的接種一般有細胞接種和瘤塊接種兩種方式,接種取材有手術活檢標本、癌性胸腹水標本和體外培養的細胞系三種。
            裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優點。
             
            造模方法:

             
            1、細胞是貼壁細胞,細胞培養在 RPMI-1640 培養基中,含 10%胎牛血清,100U/mL 的青霉素,100ug/mL 的鏈霉素,培養在 37℃含 5%CO2的細胞培養箱中。
            細胞傳代培養:當細胞長至 80-90%時,去除培養基,加入 PBS 洗 1-2 次,去除 PBS后,加入 1ml 胰酶消化 1-3min 后,加入 3ml 完全培養基中和胰酶終止消化,將消化的細胞轉移至 15ml 離心管中,1000rpm 離心 5min。倒掉上清后,加入 3ml 培養基重懸細胞,1:3 傳代至培養皿中培養。
            2、將長到培養皿 80%-90%的細胞用胰酶消化下來,1000rpm 離心,去除上清,加入完全培養基重懸細胞,將細胞分別種在 6 孔板中,每孔種 1&times;105個細胞。
            3、待細胞貼壁后,按照 MOI=1:10 的比例加入慢病毒感染細胞,感染 24h 后,去除含病毒的培養基,加入完全培養基。培養 48h 后,加入 puromycin 進行篩選。
            4、將細胞進行擴增培養。待細胞長到指定數量時,將細胞用胰酶消化下來,1000rpm離心后,去除上清,加入 PBS 將細胞洗一遍,再次加入 PBS 重懸,對細胞進行計數,將數量調整為 2&times;107個細胞/ml。 
            5、8周齡15只裸鼠適應性飼養7天后,隨機分為3組,每組分別在右腋皮下接種2&times;106(100ul/只)細胞(細胞分為對照組細胞即未處理的細胞,NC 組細胞即感染 NC 病毒的細胞,shRNA 細胞即感染 sh-RNA 病毒的細胞)。接種約兩周后出現腫瘤結節,每周用游標卡尺測量腫瘤大小兩次。將裸鼠放入鼠籠中正常飼養 4 周后處死裸鼠,取裸鼠腫瘤拍照凍存。



            英瀚斯生物可承接各類腫瘤模型實驗

            裸鼠成瘤模型 裸鼠皮下成瘤模型
            腎原位癌模型
            肝原位癌模型
            胃原位癌模型
            腸原位癌模型
            膀胱原位癌模型
            肺原位癌模型
             

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